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荧光显微镜原理应用及使用

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浏览:次 2017-05-26 14:21:28

荧光显微镜原理应用及使用 荧光显微镜原理应用及使用 (1)荧光显微镜的原理和结构特点:荧光显微镜是利用1个多发光效力的点光源,经过滤色系统发出1定波长的光(如紫外光3650入或紫蓝光4200入)作为激起光、激起标本内的荧光物资发射出各种不同色彩的荧光后,再通过物镜和目镜的放大进行视察。这样在强烈的对衬背景下,即便荧光很微弱也易辨认,敏感性高,主要用于细胞结构和功能和化学成份等的研究。荧光显微镜的基本构造是由普通光学显微镜加上1些附件(如荧光光源、激起滤片、双色束分离器和阻断滤片等)的基础上组成的。荧光光源——般采取超高压汞灯(501200W),它可发出各种波长的光,但每种荧光物资都有1个产生最强荧光的激起光波长,所以需加用激起滤片(1般有紫外、紫色、蓝色和绿色激起滤片),仅使1定波长的激起光透过照耀到标本上,而将其他光都吸取掉。每种物资被 (1)荧光显微镜的原理和结构特点:荧光显微单柱式微控材料实验机镜是利用1个多发光效力的点光源,经过滤色系统发出1定波长的光(如紫外光3650入或紫蓝光4200入)作为激起光、激起标本内的荧光物资发射出各种不同色彩的荧箱包冲击实验机光后,再通过物镜直流火花实验机和目dyf300全自动水泥压力实验机镜的放大进行视察。这样在强烈的对衬背景下,即便荧光很微弱也易辨认,敏感性高,主要用于细胞结构和功能和化学成份等的研究。荧光显微镜的基本构造是由普通光学显微镜加上1些附件(如荧光光源、激起滤片、双色束分离器和阻断滤片等)的基础上组成的。荧光光源—&mdash计量用具万能实验机;般采取超高压汞灯(501200W),它可发出各种波长的光,但每种荧光物资都有1个产生最强荧光的激起光波长,所以需加用激起滤片(1般有紫外、紫色、蓝色和绿色激起滤片),仅安全鞋紧缩实验机使1定波长的激起光透过照耀到标本上,而将其他光都吸取掉。每种物资被激起光照耀后,在极短时间内发射出较照耀波长更长的可见荧光。荧光具有专1性,1半自动轮胎漏气实验机般都比激起光弱,为能视察到专1的荧光,在物镜后面需加阻断(或手机盖实验机压抑)滤光片。它的作用有2:1是吸取和阻挡激起光进入目镜、以避免于扰荧光sht4305微机控制电液伺服万能实验机和损伤眼睛,2是选择并让特异的荧光透过,表现出专1的荧光色采。两种滤光片必须选择配合使用。荧光显微镜就其光路来分有两种:1.透射式荧光显微镜: 激安全鞋冲击实验机发光源是通过聚光镜穿过标本材料来激起荧光的。经常使用暗视野集光器,也可用普通集光器,调理反光镜使激起光转射和玻璃冲击实验机旁射到标本上.这是比较旧式的荧光显微镜。其优点是低倍镜时荧光强,而缺点是随放大倍数增加其荧光减弱.所以对视察较大的标本材料较好。2.落射式荧光显微镜这是近代发展起来的新式荧光显微镜,与上不同处是激起光从物镜向着落射到标本表面,即用同1物镜作为照明聚光器和搜集荧光的物镜。光路中需加上1个双色束分离器,它与光铀呈45。角,激起光被反射到物镜中,并聚集在样品上,样品所产生的荧光和由物镜透镜表面、盖玻片表面反射的激起光同时进入物镜,反回到双色束分离器,使激起光和荧光分开,残余激起光再被阻断球盘磨擦磨损实验机滤片吸取。如换用不同的激起滤片/双色束分离器/阻断滤片的组合插块,可满足不同荧光反应产物的需要。此种荧光显微镜的优点是视野照明均匀,成像清晰,放大倍数愈大荧光愈强。(2)荧光显微镜使用方法。1.打开灯源,超高压汞灯要预热几分钟才能到达最亮点。2.透射式荧光显微镜需在灯源与聚光器之间装上所要求的激起滤片,在物镜的后面装上相应的阻断滤片。落射式荧光显微镜需在光路的插槽中插入所要求的激起滤片/双色束分离器/阻断滤片的插块。旋转阻力实验机3.用低倍镜视察,根据不同型扁丝拉力实验机号荧光显微镜的调理装置,调剂光源中心,使其位于全部照明光斑的中钢化玻璃抗冲击性试水锤波实验机验机央。4.放置标本片,调焦后便可视察。使用中应注意:末装滤光片不要用眼直接视察,以避免引发眼的损伤;用油镜视察标本时,必须用无婴儿车动态耐用性实验机MME2屏显式材料磨损实验机荧光的特殊油镜;高压汞灯关闭后不能马上重新打开,需经5分钟后才能再启动,否则会不稳定,影响汞灯寿命。(3)视察在示教台上的荧光显微镜下用蓝紫光滤光片,可见经o.01%的丫啶橙荧光染料染色的细胞,细胞核和细胞质被激起产生两种不同色彩的荧光(暗绿色和橙红色)。 荧光显微镜原理应用及使用
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